Pipetter er laboratorieutstyr som brukes til å måle og overføre svært små mengder væske. Nøyaktighet i pipettemålinger er svært viktig fordi forskjeller i volumet som pipetten slipper kan påvirke de eksperimentelle resultatene. For å sikre nøyaktighet er det viktig å sjekke pipettekalibreringen noen få måneder. Kalibreringsprosessen er nyttig for å kontrollere om dette utstyret drypper væske i riktig volum, slik at reparasjoner kan utføres om nødvendig.
Steg
Del 1 av 2: Kontroll av kalibrering
Trinn 1. Samle de nødvendige materialene
For å kontrollere kalibreringen av pipetten er det nødvendig med en pipette, pipettespisser, destillert vann, beger, termometer, balanse og veiekopp. Balansen som brukes må være i mikrogram for å kalibrere mikropipetten med en maksimal verdi på 1 L.
- Du trenger ikke mer enn 5 ml vann. Fyll begeret med vann.
- Sørg for at pipettespissen er riktig og passer godt inn i pipetten.
Trinn 2. Mål temperaturen på destillert vann
Sett termometeret i vannet og la det sitte i minst et minutt. Hvis den røde linjen på termometeret fremdeles beveger seg, vent et minutt til. Etter ett minutt, registrer temperaturen. Ta termometeret og tørk det når du er ferdig.
Temperaturen på vannet er viktig å vite, fordi det vil bli brukt til beregninger utført for å kontrollere kalibrering
Trinn 3. Plasser veiekoppen på vekten og nullvekten
Ideelt sett har balansen som brukes en dør og et isolert rom inni. Plasser veiekoppen i balansekammeret og lukk døren. Hvis balansen din ikke har et skap og en dør, er det bare å sette en veiekopp på vekten. Trykk på "Zero" eller "Tare" -knappen og vent til skalaen viser null.
Nullstilling av vekten reduserer vekten på plastkoppen og lar deg veie bare vekten av stoffet som er plassert i koppen
Trinn 4. Forbered pipetten for kalibrering
Tørk av pipetten med etanol før du starter, og pass på at ingenting tetter pipettespissen. Fest den riktige pipettespissen til pipettespissen og bestem volumet som skal testes.
For kalibrering, test de minste og største volumene som kan fjernes fra pipetten
Trinn 5. Vask pipettespissen før du kalibrerer den
Trykk på knappen til den første grensen og dypp pipettespissen i destillert vann til en dybde på omtrent 2 mm. Slipp knappen for å absorbere noe av væsken, og slipp deretter væsken igjen ved å trykke på knappen. Gjenta dette trinnet tre ganger for å vaske droppespissene før bruk.
Trykk på knappen til den andre grensen for å fjerne gjenværende væske på pipettespissen, og ta deretter pipetten ut av vannet
Trinn 6. Ta opp kalibreringsvolumet
Med pipettespissen plassert utenfor destillert vann, trykker du på knappen til den første grensen. Dypp pipettespissen 2 mm dypt ned i destillert vann og slipp knappen for å suge væsken inn i pipettespissen. Vent omtrent 1 sekund før du fjerner dråpespissen fra vannet.
Sørg for at pipettespissen er helt nedsenket under aspirasjonsprosessen. Det bør ikke være bobler i dråpespissen, eller resultatet kan være feil
Trinn 7. Hell væsken i veieretten på balansen
Plasser pipettespissen på bunnen av veiekoppen, og trykk deretter på pipetteknappen til den første grensen. Flytt til et annet punkt, litt borte fra vannet, og trykk deretter på knappen til den andre grensen. Hold knappen inne, løft pipettespissen fra veiekoppen.
Hold spissen festet til pipetten, da du skal bruke den igjen for noen andre kalibreringstester
Trinn 8. Registrer vekten vist på balansen
Lukk balansen døren hvis du bruker en dør balanse. Vent til tallene ikke endres lenger. Skriv i notatblokken.
Det er viktig å vente til tallene på skalaen ikke endres igjen før du skriver dem ned. Notater vil gå galt hvis du ikke venter
Trinn 9. Gjenta denne prosessen for å utføre lesingen minst 10 ganger
Null skalaen igjen, vask pipettespissene før bruk, sug det samme volumet av væske, fjern volumet, og registrer deretter vekten. Registrer vekten av destillert vann for samme volum, og gjennomsnitt deretter alle notatene dine.
Du kan gjenta denne prosessen for forskjellige volumer hvis hvert volum testes flere ganger
Del 2 av 2: Beregning av kalibreringsresultatet
Trinn 1. Definer formelen for det beregnede volumet
Formelen for å beregne volumet av væske som spruttes ut av pipetten er V = w * Z, w er vannets vekt, Z er omregningsfaktoren basert på tettheten av vannet, mens V er volumet av vannmengden fjernet.
- Variabel Z kan oppnås ved å beregne tettheten til vann ved hjelp av temperaturen registrert i begynnelsen av forsøket.
- For eksempel: Hvis vanntemperaturen er 23 ° C, er Z -verdien 1.0035 g/mg.
Trinn 2. Beregn det gjennomsnittlige gjennomsnittet av pipettekalibreringene
Mengden vann som frigjøres av pipetten har blitt veid minst ti ganger. For å gjennomsnittliggjøre alle disse verdiene, legg dem sammen og del med 10. Hvis du gjorde mer eller mindre av prosessen, legger du opp de samlede resultatene og deler deretter med antall utførte forsøk.
- For eksempel: Vekten av vann fra de 10 eksperimentene du utførte med 10µL pipetten er som følger: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 og 9, 98.
- Gjennomsnittet er: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98)/10 = 99, 84/10 = 9 984
Trinn 3. Koble variablene til ligningen og løs
Når du har bestemt riktig tall for hver variabel, kobler du den til formelen og fullfører det beregnede volumet. For å løse denne ligningen, bare multiplisere gjennomsnittlig vekt av alle forsøk med Z -verdien.
For eksempel: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10, 019
Trinn 4. Beregn nøyaktigheten av pipetten
Bruk ligningen A = 100 x Vgj.sn/V0 for å beregne pipettens nøyaktighet. A indikerer pipettens nøyaktighet, Vgj.sn er det beregnede gjennomsnittlige volumet, og V0 er verdien som er angitt på pipetten. Nøyaktighetsverdien skal være mellom 99-101%.
- Hvis pipetten er riktig kalibrert, bør den beregnede verdien være veldig nær den faktiske verdien som er angitt på pipetten.
- For eksempel: A = 100 x Vgj.sn/V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
- Denne pipetten er riktig kalibrert.
Trinn 5. Send om nødvendig pipetten for kalibrering
Hvis pipetten din ikke består kalibreringstesten, må du ikke bruke den til eksperimentering akkurat nå. Pipetter er veldig skjøre og dyre laboratorieutstyr. Du kan ikke fikse kalibreringen selv, pipetten må sendes inn for reparasjon. Alternativt vil flere selskaper komme til laboratoriet ditt og kalibrere pipetten på stedet.
