Det er mange måter å måle bakterievekst på, og den ene måten er mer komplisert enn den andre. Selv om målingens konsistens noen ganger må ignoreres, er den enkleste måten nok til å måle bakterievekst nøyaktig, så den brukes ofte. De mest brukte metodene er å overvåke og telle bakterier, måle tørr eller våt masse og måle turbiditet/turbiditetsnivå. Skolens laboratorium bør ha verktøy og utstyr som trengs for å utføre minst ett av disse eksperimentene.
Steg
Metode 1 av 3: Monitoring Bacteria Live
Trinn 1. Forbered ingrediensene
Det er mange spesialverktøy som må forberedes og som kanskje ikke er tilgjengelige i et biologilaboratorium. Forbered alt utstyr og beholdere før du kjører eksperimentet, så det er ingen problemer under prosessen. Du må kjenne hver ingrediens som er brukt med en gang, og de grunnleggende vilkårene for dette eksperimentet.
- Forbered tellekammeret. Den har et innebygd kammer, mikroskopglass og mikroskop, så det er enkelt å sette opp og bruke. Du kan kjøpe den fra et laboratorium eller skoleforretningsbutikk. Dette verktøyet bør ha instruksjoner som veileder deg gjennom hele prosessen.
- Forbered en skje eller smøreskål. Begge disse beholderne lar deg overvåke bakteriene inni.
- Kultur er et begrep som brukes for å beskrive veksten av organismer i et eksperiment.
- Buljong er et flytende medium der kulturen vokser.
Trinn 2. Bruk helletallerkenen eller smøreplaten
Du kan også plassere bakteriene direkte på fatet for visning ved hjelp av et mikroskop. Hell kulturen på en tallerken og legg den under mikroskopet. Overvåk antallet tilstedeværende bakterieceller.
Trinn 3. Kontroller at konsentrasjonsdosen er riktig
Hvis det er for mange, vil bakteriene hoper seg opp på hverandre, og du kan regne feil. Fortynn kulturen ved å blande i mer buljong. Hvis det er for få, vil resultatene av beregningen ikke være nøyaktige. Sil buljongen med et filtreringssystem.
Trinn 4. Tell bakterier
Det siste trinnet er å telle bakteriene en etter en. Se gjennom forstørrelseslinsen i tellekammeret og skriv ned antall bakterier du ser. Sammenlign resultatene med resultatene fra andre tester.
Metode 2 av 3: Måling av tørr og våt masse
Trinn 1. Kontroller at du har riktig utstyr
Denne metoden bruker dyrt utstyr og mye tid. Hvis laboratoriet ditt ikke har utstyret du trenger, er det lurt å bruke en annen metode. Men hvis laboratoriet ditt er tilstrekkelig godt utstyrt, anbefaler vi denne metoden, da den gir mer konsistente resultater. I denne metoden trenger du:
- Hydraulisk tyngdekraftkonveksjon
- Vektbeholder laget av aluminium
- Et sett med kolber (laboratorieflasker)
- Sentrifugalmaskin (sentrifuge) eller laboratoriefiltreringssystem
Trinn 2. Kontroller at kulturen er i kolben
Legg kulturen til gresskaret. På dette stadiet bør kulturen være en kjøttkraft, selv om den senere vil skilles igjen.
Trinn 3. Tørk aluminiumsbeholderen i laboratorieovnen
I stedet kan du bruke en celluloseacetatfiltermembran med en diameter på 47 mm og en porestørrelse på 0,45 um. Uansett hvilken veiebeholder du bruker, veier den, da den må trekkes fra senere når du veier bakterieceller.
Trinn 4. Rør kulturen i kolben til den er jevnt blandet
Cellen synker naturlig på grunn av tyngdekraften og må omrøres for å spre seg jevnt i kolben. På den måten kan du ha flere prøver.
Trinn 5. Bruk en sentrifuge til å skille bakteriecellene fra buljongen
Dette verktøyet roterer kolben og ekvilibrerer raskt slik at den tapper buljongen og etterlater kulturen i kolben.
Trinn 6. Skrap av pastaen på gresskaret og legg den i en veiebeholder
Kast buljongen fordi du ikke trenger den lenger. Imidlertid må du ikke bli kvitt gresskaret ennå, fordi det fortsatt vil bli brukt.
Trinn 7. Skyll sentrifugalmaskinen og hell skyllevannet i beholderen
Slipp skyllevannet i kolben på bakteriecellene for å oppnå våtvekten.
Trinn 8. Finn tørrvekten
For å måle tørrvekten, plasser beholderen i ovnen og tørk ved 100 ° C i 6-24 timer i henhold til instruksjonene fra ovnen og/eller den brukte beholderen. Pass på at temperaturen ikke er for høy, slik at bakteriene ikke brenner seg. Vei bakteriene når du er ferdig, og ikke glem å redusere resultatet med vekten av veiebeholderen.
Metode 3 av 3: Måling av turbiditet
Trinn 1. Forbered nødvendig utstyr
Du trenger en lyskilde og et spektrofotometer. Begge kan fås i laboratoriebutikker. Spektrofotometeret skal ha instruksjoner som veileder deg i bruk av instrumentet i henhold til modellen du har. Prisen på spektrofotometeret er ganske rimelig og enkel å bruke, slik at det kan bli en av de mest brukte metodene for måling av bakterievekst.
Trinn 2. Tenn prøven
I følge Laymans begrep er turbiditet turbiditetsnivået til en prøve. Du må få turbiditetsmålingstallet, som måles i NTU (Nephelometric Turbidity Unit). Dette verktøyet må kalibreres før det kan måle prøven nøyaktig.
Trinn 3. Registrer resultatene
Turbiditet påvirkes av antall bakterier i prøven. Spektrofotometeret vil også fortelle deg prosentandelen for overføring (%T). Dette tallet vil øke hvis turbiditeten synker. Sammenlign resultatene med resultatene fra andre tester for å måle bakterievekst.
Advarsel
- Siden du har å gjøre med en bakteriekoloni, må du ta forholdsregler ved å bruke verneutstyr som vernebriller og hansker. Det er også en god idé å bruke maske, spesielt hvis du ikke vet hvilken type bakterier som studeres.
- Ta forhåndsregler før du håndterer noen type bakterier, selv den ufarlige typen. Sørg for at alle åpne sår på kroppen din er helt dekket før du starter.
